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miRNA 3' UTR靶標(biāo)表達(dá)克隆

產(chǎn)品價(jià)格:
廠商性質(zhì): 工程商 產(chǎn)品時(shí)間: 2020-12-31
美國GeneCopoeia(復(fù)能基因)提供基于*基因組miRNA作用的靶標(biāo)表達(dá)克隆,涵蓋了公共數(shù)據(jù)庫。miRNA靶標(biāo)表達(dá)克隆包含SV40啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的報(bào)告基因(螢火蟲熒光素酶)的下游緊接3’-UTR(即miRNA作用位點(diǎn))序列。 第二個(gè)報(bào)告基因renilla luciferase,可用于監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)染,表達(dá)效率,并可以作內(nèi)參。
 人類基因組miRNA靶標(biāo)表達(dá)克隆的特點(diǎn)

 

通過螢火蟲熒光素酶的活性分析,可獲得miRNA對(duì)潛在靶標(biāo)基因調(diào)控作用的結(jié)果。表達(dá)克隆轉(zhuǎn)錄后形成螢火蟲熒光素酶ORF與3’UTR的嵌合體mRNA,如果有特異的miRNA可與3’-UTR某段序列互補(bǔ)結(jié)合,嵌合體中熒光素酶ORF所編碼蛋白的活性也相應(yīng)受到調(diào)控, 因此通過檢測(cè)熒光素酶的發(fā)光強(qiáng)度就可以定量地測(cè)定miRNA對(duì)應(yīng)靶標(biāo)的mRNA調(diào)控的效果。

miRNA 前體和靶標(biāo)表達(dá)克隆的應(yīng)用

  • 基因表達(dá)調(diào)控:通過轉(zhuǎn)染或病毒顆粒感染的方式將單個(gè)或整套的miRNA導(dǎo)入培養(yǎng)細(xì)胞,進(jìn)行單個(gè)miRNA或多個(gè)miRNA對(duì)基因的表達(dá)調(diào)控。對(duì)miRNA的調(diào)控效應(yīng)和功能進(jìn)行特定條件或體統(tǒng)化的研究
  • miRNA靶標(biāo)基因的確認(rèn)和鑒定:利用miRNA靶標(biāo)驗(yàn)證表達(dá)克隆,進(jìn)行大規(guī)模的miRNA作用靶標(biāo)基因的篩選和確證。一個(gè)miRNA可作用的所有靶標(biāo)的基因,和可作用于一個(gè)mRNA的3’-UTR所有miRNA

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